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透析袋使用前的处理与方法
更新时间:2016-03-02   点击次数:1055次

透析袋使用前处理:   

1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。   

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。   

3. 用蒸馏水*清洗透析袋。 ELISA试剂盒  

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。   

5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。   

6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。 

    透析袋中文名称:透析袋 英文名称:dialysis bag 。透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,就称做透析袋。在生物大分子的制备过程中,除盐和少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等等都要用到透析的技术。

    透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。透析膜的材质:透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的zui多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。

    透析已成为生物化学实验室zui 简便zui常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除 去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品 溶液置入袋内, 将此透析袋浸入水或缓冲液中, 样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留 在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析 液”。 ELISA试剂盒 

   透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜 的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度, 通常是 4℃透析,升高温度可加快透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的zui多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的 是美国 Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司的各种尺寸的透析管, 截留分子量 MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的zui小分子量,缩写为 MwCO)通常为 1 万左右。 商品透析袋制成管状,其扁平宽度为 23 mm~50 mm 不等。为防干裂,出厂时都用 10% 的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质 和其它生物活性物质有害,用前必须除去。可先用 50%乙醇煮沸 1 小时,再依次用 50%乙 醇、0.01 mol/L 碳酸氢钠和 0.001 mol/L EDTA 溶液洗涤,zui后用蒸馏水冲洗即可使用。实 验证明, 50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。

    使用后的透析袋洗净后可存于 4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量 NaN2,以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易裂 口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。 新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使 用。 使用时, 一端用橡皮筋或线绳扎紧, 也可以使用特制的透析袋夹夹紧, 由另一端灌满水, 用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析 过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的 蛋白质溶液透析时,体积增加 50%是正常的。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析, 可在袋内放一截 两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管, 以使透析袋沉入液 面以下。 检查透析效果的方法是: 1% BaCl2 检查(NH4)2SO4, 1% AgNO3 检查 NaCl、 用 用 KCl 等。 为了提高透析效率,还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易 的透析装置。美国生物医学公司(Biomed Instruments Inc.)的各种型号的 Zeineh 透析 器,由于使用对流透析的原理,使透析速度和效率大大提高. ELISA试剂盒 

 

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