胶体金免疫层析技术已其单份检测、简单快速、特异灵敏、无需辅助试剂和仪器、肉眼观察结果、结果可长期保存等特点,成为当今zui快速灵敏方便的免疫学检测技术之一,特别适用于医院、基层单位、野外作业以及时间紧迫的检查和大面积普查。
随着胶体金层析技术的进步,胶体金结合物的灵敏度逐步提高。目前,在大多数快速诊断分析中,检测下限达到1ng/ml。如果采用高质量的抗体,快速诊断分析检测下限甚至可以达到10pg。随着银增强技术对检测灵敏度的进一步提高,或许检测灵敏度会提高10-100倍。
胶体金免疫层析检测的底层一般是硝酸纤维素膜,在它上面固定了检测蛋白,通常是抗体或抗原。连接着膜的是包含有干燥金标的金标垫(通常是玻璃纤维)。在现有的大部分试纸条中,金标垫的金颗粒能特异性吸附于检测物的抗体或抗原。样品垫通常是纸,粘贴着金标垫。当液体样品用在样品垫上,液体由毛细作用力扩散通过金标垫,使干燥金标复水并使得样品中的分析物特异性作用于金标。金标和分析物的复合物扩散到膜上,并向检测蛋白移动,在那里复合物被固定住,产生清楚的信号——一条红线。第二条线是控制线,在膜上由多余的金标记显色形成,用于表示检测完成和质量控制。
在快速诊断应用的初期是用乳胶作为标记物来产生信号,现在仍有一些产品使用这个方法。过去和现在,乳胶法一直是凝集反应主要的标记方法,这是因为它在结合成分的存在下易于凝集。但对于快速诊断试剂来说,标记物的稳定性对避免假阳性是非常重要的,因此易凝集的特性会成为大难题。因为具有强潜在稳定性,金标记在80年代后期被引入到快速诊断试剂中。在合适的条件下,任何大小的金颗粒都可以。的高稳定性、高灵敏度、高精度和高可重复性使得金适合用于在快速诊断试剂中性,降低金标的非特异性结合。当蛋白质和金颗粒正确连接时,蛋白质能牢固地结合在金颗粒表面,无论是液态或固态都能保持长久的稳定。抗体