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阴性染色产生的原因
更新时间:2015-07-31   点击次数:1458次

我先用石蜡切片做了5次,结果一直不理想(表现为未见特异性强染色);近几日,我又切了冰冻切片,做了2次,终于基本成功了。在这个过程中,我对免疫荧光染色技术有了全新的认识,而前些天发出免疫荧光求助贴,回复的很少,所以有必要加强对免疫荧光方面的讨论),不妥之处敬请指正。有人会问酶免疫组化做的好好的,为何要做免疫荧光?其实,这也是我以前思考的难题,现在我认为可能胞膜蛋白含量不高,用普通免疫免疫组化可能做不出来,需要敏感的免疫荧光方法来进行蛋白检测(我是看许多外文文献都是这样做的,因此选择免疫荧光染色。)抗体

阴性染色产生的原因有:
(1)一抗和二抗浓度不合适或孵育条件不妥。

(2)荧光素提前衰退。荧光素质量不佳或操作过程中没有注意避光等防止荧光素衰退的事项。

(3)血清封闭时间过长。

(4)抗体稀释液PH值不合适,影响抗原抗体反应。

(5)组织切片不平、裂片或脱片很严重,易引起大块阴性着色。

(6)组织标本不新鲜或已经冷冻组织制成的切片中抗原易弥散,易引起本来表达的部位阴性染色或弱着色。

(7)荧光显微镜不会使用,激发波长选择错误。

Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit   小鼠溶菌酶  规格:  48T/96T
Mouse lymphocyte factor ELISA Kit  小鼠淋巴细胞因子  规格:  48T/96T
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit  小鼠乳酸脱氢酶  规格:  48T/96T
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit  小鼠角化细胞内分泌因子/双调蛋白  规格:  48T/96T
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit   小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6  规格:  48T/96T
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Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit   小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白  规格:  48T/96T
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抗体Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit  小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽  规格:  48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit  小鼠CD3分子  规格:  48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit  小鼠CD19分子  规格:  48T/96T
Mouse c-jun ELISA Kit   小鼠c-jun  规格:  48T/96T

 

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