Lowicryls:Lowicryls是丙烯酸盐(acrylate)和甲基丙烯酸盐(methacrytate)化学物质,包括K4M、K11M、KM23等。其主要特点是在低温下(K4M:一35℃;K1tM和KM23:-60~-80℃)仍保持低黏度,并具有在紫外光(波长360nm)照射下聚合的能力。这种光聚合作用与温度无关,但实验中为保持包埋剂的低黏稠度,以利于其向组织细胞内渗透,要求在低温下照射。在这些包埋剂中,K4M和K11M具有亲水性,能较好地保持组织细胞的微细结构和抗原性,特别适于免疫细胞化学染色,且背景染色低,是超微结构定位组织细胞抗原的良好包埋剂。KM23为疏水性,图像反差好,较适于扫描电镜和透射电镜的暗视野观察标本制作。
包埋剂的配制:商品Lowicryls包埋剂由三部分组成,即单体(monomer)、交联剂(crosslinker)和引发剂(initiator)。调整单体和交联剂的比例,可制备软硬度合适的包埋块(包埋时多用硅胶囊代替橡胶或塑料制品,后两者影响紫外线的吸收)。配制比例
K4M 8.65g l7.30g 25.95g 34.6g
交联剂 1.35g 2.70g 4.05g 5.4g
引发剂 0.05g 0.10g 0.15g 0.20g
合计 10.05g 20.10g 30.15g 40.20g
一般可分别用注射器取包埋剂,置于玻璃烧杯内,天平称量,将三者按顺序加入后用玻璃棒轻轻搅动3~5分钟。切忌过分用力搅拌,以防产生气泡,影响包埋效果。细胞