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淋巴细胞亚群的计数
更新时间:2015-07-13   点击次数:1036次


外周血中存在几种成熟的淋巴细胞亚群。78组成这些亚群的有:具多种不同功能的胸腺淋巴(T)细胞;合成和分泌特异性抗体,来源于淋巴结的(B)淋巴细胞;null细胞(也叫第三群细胞),它参与抗体介导的细胞毒作用及自然细胞毒作用(自然杀伤细胞)。这些亚群是根据结合在细胞膜上的一个或多个糖蛋白而定义的。根据簇设计和表达各种抗原的细胞类型,可以在附录的CD分子表中,找到这些糖蛋白的列表。这些糖蛋白许多都被认为对分子功能很重要。但在T淋巴细胞中,一个单独的细胞表面糖蛋白的出现并不能说明细胞的功能特征。79.80例如,有些带CD8标志的T淋巴细胞是细胞毒细胞,其它的却是抑制/效应细胞。带CD4标志的T淋巴细胞更异质:有些作为诱导细胞促进效应细胞克隆的扩大;有些作为辅助细胞,促进抗体分泌性B淋巴细胞的生长;还有其它的作为抑制/效应细胞或迟发性变态反应的效应因子。

细胞膜表面糖蛋白很有用,因为它使识别和计数具有不同功能的淋巴细胞亚群成为可能。但目前有关T淋巴细胞表面糖蛋白的描述,通常都定义了实行不止一种功能的亚群。带有某一特定糖蛋白标志物的细胞数增加或减少,并不意味那些细胞在体内只实行某一特定功能。由于这个原因,淋巴细胞亚群的计数结果与疾病诊断或对治疗的反应有经验上的。而且,这些经验上的关联,在临床上很有用。

计数血液中淋巴细胞亚群的方法是以多克隆抗体的提供为基础的,这些多克隆抗体能识别单独的细胞表面糖蛋白。典型的操作是:将荧光标记的多克隆抗体与外周血一起孵育,然后在流式细胞仪中计数反应细胞。流式细胞仪是由一个或多个激光源、成像检测器和细胞束(该细胞束能直接通过激光光路)产生装置构成的细胞分析仪。用直角光散射,调节流式细胞仪,可根据淋巴细胞的大小识别淋巴细胞,合适抗体处理细胞后,用直接荧光计数带有特异细胞表面糖蛋白的淋巴细胞。通常用结合不同荧光的两种不同抗体同时计数带有特异性表面糖蛋白的淋巴细胞,该技术叫荧光分析法,它用处很大。当定义了更多的表面标志物的时候,就有可能鉴别和定量在体内仅实行某一单独功能的淋巴细胞亚群。83而且,体内刺激细胞后,通过检测细胞因子的合成,也能确定特异性的细胞亚群在功能上是否完整。使用能通透细胞的试剂,然后用相应的单克隆抗体染色,可检测好几种细胞因子(如肿瘤坏死因子,IL-2,γ干扰素)。

淋巴细胞亚群的计数,也叫T或B细胞表面标志物的分析,由此得到不同类型的结果。每一种淋巴细胞亚群的百分数和数,都应该与健康个体的结果做对比。另外,在典型的分析中,应报告一型与另一型(如辅佐/诱导,抑制/细胞毒细胞比率)的比率。

 

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