ELISA试剂盒进口大鼠实验稀释血清的步骤:
先把蛋白稀释一定的倍数,比如说10倍、20倍稀释(这样可以大体确定一个参数),将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。
在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释?有两个原因:
1)竞争抑制比较明显,应稀释竞争物;
2)血清中含有的性腺激素比较低,应该浓缩才对。
血清稀释用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,当然如果你嫌麻烦我觉得用生理盐水替代PBS关系也不大。不管你是用直接竞争还是间接竞争,血清的稀释倍数肯定要事先确定,但也不用一点点,你做一个预试验即可,选择OD在1.0左右的稀释倍数,即你的竞争ELISA试剂盒进口大鼠中阴性孔OD在1.0,这样作出来的曲线比较敏感。
250 Kligler Iron Agar 用于细菌复合生化试验(葡萄糖,乳糖) 克氏双糖铁琼脂
250 Blood Agar Base N0.2 供分离营养要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板 血琼脂基础2号
250 Blood Agar Base 供分离营养要求较高的致病菌用,后加血液制成血平板 血液琼脂基础
250 Blood Enrichment Medium 用于从血液中分离病原菌 血液增菌培养基
250 TTC-Sabourand’s Medium 用于分离真菌,酵母菌等 氯化三苯四氮唑-沙保罗培养基
250 Maconkey Agar 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂
250 Maconkey Agar(without salt) 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂(不含盐)
250 Maconkey Agar No.2 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂2号
250 Maconkey Agar No.3 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂3号
250 Alkaline Agar 用于分离霍乱弧菌 碱性琼脂平板
250 Alkaline Bile Salt Agar 用于分离霍乱弧菌 碱性胆盐琼脂
ELISA试剂盒进口大鼠